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活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒使用說明書

發布時間:2017/11/16      點擊次數:3096

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活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

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價格(元)

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4053

100T(1ml)

4

245

 

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan,參考圖1)。WST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

 

圖1:WST-8分子結構及檢測原理

運輸與保存方法

冰袋運輸。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放數年,反復凍融會造成測定背景O.D值升高,如經常使用,建議存放于4℃即可。

操作方法

1. 在96孔板中配制100 μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時 (在37℃,5% CO2的條件下)。

2. 向培養板加入10 μl不同濃度的待測物質。如果測定細胞活性,則不需要2-3步驟,直接從第四步操作。

3. 將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6,  12, 24或48小時)。

4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響O.D值的讀數)。

5. 將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

6. 用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。

注意事項

1)CCK-8試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化反應,如果待檢測體系中有較多還原劑(或抗氧化劑)會造成背景O.D值升高,干擾檢測結果。如果實驗中有還原劑,請檢查背景的O.D值,即測定、比較空白培養基加入藥物與不加藥物的培養基(含細胞)在加入CCK- 8試劑后的O.D值,如果空白O.D值明顯偏高,則說明有反應,應設法去除或折算干擾因素。

2)如果細胞培養時間較長,培養基顏色發生變化,應洗滌細胞更換培養基后再加CCK-8檢測。細胞培養基酚紅不影響測定結果。

3)為使CCK-8試劑盒培養基充分混勻,減少CCK-8在移液器上的殘留,建議加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑,混勻后加樣。

4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

CCK-8與同類試劑比較

 

檢測方法

MTT

XTT

WST-1

CCK

產品性狀

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

現配現用

即開即用

即開即用

檢測靈敏度

很高

很高

檢測時間

較長

較短

較短

zui短

檢測波長

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

細胞毒性

高,細胞形態*消失

很低,細胞形態不變

很低,細胞形態不變

很低,細胞形態不變

試劑穩定性

一般

較差

一般

很好

批量樣品檢測

可以

非常適合

非常適合

非常適合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便

 

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產品名稱

貨號

規格

保存

價格(元)

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4053

100T(1ml)

4℃

245

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4054

500T(5ml)

4℃

595

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4055

1000T(10ml)

4℃

1050

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4056

3000T(30ml)

4℃

2080

活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

D3100L4057

10000T(100ml)

4℃

5850

 

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